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新发突发呼吸道传染性病原微生物分级检测专家共识(2024)
详细信息Expert Consensus on Tiered Detection of Newly Emerging and Outbreak Respiratory Infectious Pathogens (2024)
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摘要:
近年来, 呼吸道传染性疾病不断暴发流行, 给全球公共卫生和医疗卫生体系带来了巨大挑战。如何及时采取分级筛查和检测策略, 系统覆盖引起呼吸道急性感染的临床常见传染性病原体、慢性感染或少见呼吸道传染性病原体, 着眼可能的新发突发呼吸道传染性病原体, 快速明确致病微生物, 成为临床诊断亟需解决的问题。为此, 中国医院协会临床微生物实验室专业委员会组织多学科专家, 总结目前国内实验室检测在临床实践中所积累的应用经验, 结合当前国际最新研究进展, 共同编写了《新发突发呼吸道传染性病原微生物分级检测专家共识(2024)》。本共识通过分析重大新发突发呼吸道病原体传染性和感染特点, 兼顾患者人群特征, 制定了包含传统微生物形态学、培养、免疫学、分子生物学以及宏基因组测序等方法的三级检测策略, 明确了在不同阶段针对的目标病原体及推荐检测方法, 为提高新发突发呼吸道传染病的诊断能力提供了指导建议和参考依据。
Abstract:In recent years, respiratory infectious disease outbreaks have been continually emerging internationally, posing significant challenges to global public health and healthcare systems. How to promptly implement a tiered screening and detection strategy that systematically covers common clinical infectious pathogens causing acute respiratory infections, pathogens causing chronic respiratory infections, and rare respiratory infectious pathogens, while focusing on potential newly emerging respiratory infectious pathogens, and quickly identifying the causative microorganisms, has become a critical issue in clinical diagnosis. To address this issue, the Chinese Hospital Association Clinical Microbiology Laboratory Specialized Committee assembled a multidisciplinary group of experts to summarize the practical experience accumulated in domestic laboratory testing.Incombination with the latest international research progress, they developed the Expert Consensus on Tiered Detection of Newly Emerging and Outbreak Respiratory Infectious Pathogens (2024). This consensus analyzes the major characteristics of newly emerging and outbreak respiratory infections, considers patient population characteristics, and proposes a three-tiered detection strategy that includes traditional microbiological morphology, culture, immunology, molecular biology, and metagenomic sequencing methods. It defines the target pathogens and recommends detection methods at different stages, providing guidance and reference for improving the diagnostic capacity for newly emerging and outbreak respiratory infectious diseases.
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Keywords:
- respiratory infectious disease /
- infectious pathogens /
- newly /
- emerging /
- pathogen detection
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膝骨关节炎(knee osteoarthritis, KOA)是一种膝关节退行性疾病，其病理特征为滑膜炎症、骨质增生、骨赘形成及关节软骨的逐渐丢失，进而引发关节疼痛、肿胀、畸形和活动受限等临床症状[1-2]。若长期不治疗，KOA可能会造成关节功能丧失，严重影响患者的生活质量[3-4]。目前临床常用的治疗方式包括非药物治疗、药物治疗、手术治疗等[5-7]。上述治疗手段主要致力于缓解疼痛、改善关节功能以及延缓KOA的进展，并不能彻底修复关节软骨的损伤，且患者可能需要面临多次手术治疗，无疑加重了其经济负担[2-3]。间充质干细胞(mesenchymal stem cells，MSCs)作为再生医学的热门研究方向，已在治疗缺血性心力衰竭、皮肤创伤、移植排异、糖尿病、肝病以及神经损伤等多种疾病中显示出较大潜力[8-13]。MSCs来源广泛，在骨髓、脂肪组织、脐带、滑膜、滑液、牙髓、毛囊、扁桃体和胎盘等多种组织中均有发现[3, 7, 14-17]。其中，人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells, hUC-MSCs)因无创、便利的获取方式以及较少的伦理争议，被认为是首选的MSCs来源[10, 18-20]。本文将阐述hUC-MSCs在KOA治疗方面的作用原理、干预方案、效果及安全性，以期为KOA临床治疗提供更多可行方案。
1. hUC-MSCs在KOA治疗中的作用原理及应用基础
1.1 作用原理
1.1.1 促进软骨再生
促进软骨再生是hUC-MSCs区别于其他传统治疗方式的关键。已知的具体机制可概括如下：(1)通过分化为软骨细胞，直接参与软骨的合成[21-24]；(2) 通过激活Wnt/β-catenin信号通路，增强软骨细胞的增殖与分化能力[25]；(3)分泌生长因子和细胞因子，如血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)、转化生长因子β(transforming growth factor-β, TGF-β)等，促进软骨细胞的增殖和分化，增加软骨基质的合成，同时增加Ⅱ型胶原蛋白(collagen type Ⅱ, Col-Ⅱ)和降低基质金属蛋白酶13(matrix metalloproteinase 13, MMP13)及含Ⅰ型血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶-5 (a disintegrin and metallo-proteinase with thrombospondin motifs-5, ADAMTS-5)的合成，维持软骨内环境平衡，以减少软骨损伤[23-31]；(4)上调软骨形成相关基因表达，如X型胶原蛋白(collagen type Ⅹ, Col-Ⅹ)、B细胞淋巴瘤-2基因(B-cell lymphoma-2, BCL-2)和TSG-6基因(tumor necrosis factor alpha-stimulated gene-6)的表达，促进软骨细胞存活[22]；(5)通过抑制mTOR途径和激活自噬，减少软骨细胞凋亡[30]。上述机制协同作用，可有效增加软骨厚度，促进软骨基质合成与沉积，同时维持软骨微环境的稳态，从根本上解决了因软骨丢失而引起的KOA问题。
1.1.2 调节炎症反应
调节炎症反应是延缓KOA进展的基础[22, 32]，已知的具体机制包括：(1)调节炎症因子发挥抗炎作用：一方面降低促炎因子如一氧化氮(nitrogen monoxide, NO)、白细胞介素(interleukin, IL)-6、IL-1β和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α, TNF-α)的水平，另一方面分泌IL-10和IL-4等抗炎因子，有效减轻关节炎症和软骨破坏程度[27, 31-32]；(2)促进巨噬细胞极化：通过调节巨噬细胞的极化状态，促进巨噬细胞从促炎向抗炎状态转变，从而抑制炎症[26]；(3)调节免疫反应：hUC-MSCs可分泌吲哚胺2, 3-双加氧酶(indoleamine 2, 3-dioxygenase, IDO)，抑制T细胞增殖，调节免疫反应，进一步减轻炎症反应[28, 33]。通过调控免疫反应和抗炎途径，hUC-MSCs显著降低了KOA的炎症水平，有效缓解关节软骨破坏进程。
1.2 应用基础
目前，hUC-MSCs关节内注射治疗已在大鼠、小鼠、兔、绵羊等动物模型中进行了在体实验。实验结果一致证明，hUC-MSCs能够减轻KOA引起的软骨破坏和炎症反应，促进软骨缺损修复，并延缓KOA进展，同时展现出良好的安全性和有效性 [21-22, 25-27, 31-32]。具体而言，通过向KOA大鼠模型膝关节中注射hUC-MSCs，发现hUC-MSCs不仅可有效减轻术后膝关节炎症反应，还可显著提升关节的活动能力[22, 25-26, 31]。CT和X线检查结果显示，hUC-MSCs可显著改善软骨下骨的密度和形态，减少骨赘形成，缓解关节腔狭窄情况[25, 31, 34-35]。对手术部位的软骨进行取材染色发现，hUC-MSCs治疗组的软骨结构更完整，软骨细胞排列更整齐，软骨基质染色强度增强，且软骨厚度较术前增加了125%[25-26, 31]。这表明hUC-MSCs治疗不仅可增加关节软骨厚度，减缓关节软骨破坏，还改善了关节腔的整体环境。
此外，Tong等[22]通过对比单次与多次注射hUC-MSCs的效果发现，多次注射可更显著地改善大鼠软骨侵蚀并有效减缓疾病进展。同时，研究人员对hUC-MSCs与透明质酸(hualuronic acid, HA)、氧化石墨烯颗粒润滑剂联合应用发现，相较于单独使用hUC-MSCs，联合应用能更有效地促进新西兰兔和绵羊膝关节的软骨修复[21, 32, 36]。且这些研究均未报告与治疗相关的严重不良反应或死亡事件，进一步显示使用hUC-MSCs治疗的安全性。
2. hUC-MSCs在KOA治疗中的临床研究
2.1 临床研究设计类型及特征
笔者共检索到13项关于hUC-MSCs治疗KOA的临床研究，患者年龄18~67岁，无未成年人参与。膝关节病损情况以中重度为主，主要纳入Kellgren Lawrence(KL)2~4级和国际软骨修复协会(International Cartilage Repair Society, ICRS)评分Ⅲ~Ⅳ级的患者，少量纳入KL 1级的KOA轻度患者。随访时间从3个月至5年不等，可有效观察hUC-MSCs治疗的疗效及不良反应(表 1)。
表 1 hUC-MSCs在KOA治疗中的临床应用研究Table 1. Clinical application of hUC-MSCs in KOA treatment作者(发表年份) 试验设计 研究对象 干预措施 结果 Wang等[37](2016) 随机对照试验，随访6个月，采用SF-36量表、Lysholm量表、WOMAC评分 36例中重度KOA患者 来源：脐带中(未明确具体组织)提取和培养
用量：1×107细胞/mL，2.5~3.0 mL/关节
试验组：关节内注射hUC-MSCs，每月1次，共2次
对照组：关节内注射玻璃酸钠，每周1次，共5次术后第1、2个月，两组评分均有改善，组间无明显差异；术后3~6个月，试验组评分较前改善明显，对照组评分无明显变化，试验组评分改善优于对照组；试验组88.89%出现术后疼痛，66.7%出现轻度肿胀，对照组22.2%出现术后疼痛，11.1%出现轻度肿胀 Matas等[38](2019) 随机对照试验，随访12个月，采用VAS、WOMAC、SF-36生活质量评分 29例KL 1~3级KOA患者 来源：Wharton jelly中提取和培养
用量：2× 107细胞/关节
试验组：1组关节内注射1次hUC-MSCs;
2组关节内注射2次hUC-MSCs，间隔6个月
对照组：关节内注射HA 2次，间隔6个月术后12个月，试验2组评分显著优于对照组，在疼痛和功能障碍的改善方面优于试验1组和对照组；试验1组和2组100%出现膝关节积液，组间无显著差异 Park等[39](2020) 随机对照试验，48周临床试验，随访5年，采用WOMAC和IKDC评分 114例ICRS Ⅳ级KOA患者 来源：脐带血中提取和培养
用量：无
试验组：hUC-MSCs+4%HA
对照组：微骨折手术
具体剂量及频次未提及48周时，试验组97.7%的患者改善了至少1个ICRS等级，而对照组为71.7%；在3~5年随访中，试验组在疼痛和评分方面的改善显著优于对照组；组间不良事件无显著差异，缺少具体数据内容 Song等[40](2020) 回顾性研究，随访3年，采用IKDC、WOMAC和ICRS评分 125例ICRS Ⅳ级的KOA患者 来源：Cartistem®
用量：0.5 mL/ cm2缺陷区域，0.5×107细胞/mL
试验内容：植入Cartistem®术后1年，所有评分均有改善，且术后第2年评分相较于第1年评分有所改善；未报告不良反应 Lim等[17](2021) 随机对照试验，48周临床试验，5年扩展随访，采用WOMAC、IKDC、VAS和ICRS评分 114例ICRS Ⅳ级的KOA患者 来源：Cartistem®
用量：0.5 mL/ cm2缺陷区域，0.5×107细胞/mL
试验组：植入Cartistem®
对照组：微骨折手术术后48周，试验组97.7%改善≥1 ICRS级，对照组为71.7%；术后5年随访发现，试验组在疼痛和功能改善方面更显著；未报告不良反应 Lee等[24](2021) 回顾性研究，随访1年，采用ICRS评分 74例接受了HTO治疗的中重度KOA患者 来源：Cartistem®
用量：剂量与频次未详述
试验组：HTO与微骨折结合植入Cartistem®
对照组：HTO与微骨折结合BMAC术后1年，两组评分均有改善，通过关节镜检查发现试验组相较于对照组的软骨再生效果更好；未报告不良反应 Cole等[41](2022) 1/2a期临床试验，随访24个月，采用IKDC评分 12例ICRS Ⅲ~Ⅳ级的KOA患者 来源：Cartistem®
用量：0.5 mL/cm2缺陷区域，0.5×107细胞/mL
试验内容：植入Cartistem®
1组：初始软骨缺损面积为2~5 cm2
2组：初始软骨缺损面积大于5 cm2术后12~24个月，评分均有改善，疼痛及关节功能改善明显；100%出现了活动范围减少，92%出现了关节疼痛，50%出现了关节肿胀，50%出现了关节积液，组间不良反应发生率无明显差异 Samara等[42](2022) 前瞻性研究，随访2年，采用KOOS评分 16例KL 3~4级KOA患者 来源：Wharton jelly中提取和培养
用量：0.6×106细胞/kg
试验内容：通过超声引导下关节内注射hUC-MSCs，间隔1个月，共计2次术后1~2年进行随访，评分显著降低，功能和疼痛得到显著改善；术后1年进行MRI复查显示，患者软骨缺损、骨刺、骨髓病变、关节积液和滑膜炎等均显著改善；6.25%出现了关节积液，6.25%出现了浅表静脉炎 Kim等[43](2023) 回顾性研究，随访24~32个月，采用IKDC、KOOS和ICRS评分 156例KL 3~4级KOA患者 来源：Cartistem®
用量：0.75×107细胞/关节
试验组：HTO结合植入Cartistem®
对照组：HTO结合植入纤维蛋白胶支架搭载的SVF术后12个月，两组评分均有改善，试验组评分相对较好，但组间无显著差异；两组均未观察到不良反应 Ao等[44](2023) 前瞻性研究，随访3个月，采用VAS、WOMAC、MOCART和SF-12生活质量评分 14例KL 2~3级KOA患者 来源：Wharton jelly中提取和培养
用量：1.5×107细胞/关节
试验内容：关节内注射hUC-MSCs，每周1次，共4次术后3个月，所有评分均有所改善；35.7%的患者出现了关节疼痛、肿胀、麻木和僵硬 Mautner等[45](2023) 随机对照试验，随访12个月，采用VAS、KOOS评分 480例KL 2~4级KOA患者 来源：脐带血中提取和培养
用量：剂量与频次未详述
试验组：分别接受超声引导下自体BMAC、SVF和hUC-MSCs关节内注射
对照组：接受皮质类固醇关节内注射术后1年，试验组与对照组评分均有改善，但组间无明显差异；SVF组术后挫伤发生率为38.6%，术后血肿发生率为12.4%；hUC-MSCs组关节肿胀发生率为24.1%；对照组关节肿胀发生率为7.4% Park等[46](2023) 回顾性研究，随访1~6年，采用VAS、WOMAC、ICRS宏观评估 12例ICRS Ⅳ级KOA患者 来源：Cartistem®
用量：0.75×107细胞/关节
试验内容：HTO结合植入Cartistem®术后18个月，进行关节镜检查，每例患者的评分均有改善，80%的ICRS评分提升至Ⅱ级及以上，20%提升至Ⅲ级；未报告不良事件 Matas等[47](2024) Ⅰ期剂量递增试验，随访12个月，采用VAS、WOMAC评分和MRI 40例KL 1~3级KOA患者 来源：商品化的hUC-MSCs(未明确具体组织)
试验内容：关节内注射hUC-MSCs
低剂量组：0.2×107细胞/关节
中剂量组：2×107细胞/关节
高剂量组：8×107细胞/关节术后第3~6个月，患者关节疼痛和功能显著改善，评分均有改善；低剂量组40%出现了术后疼痛，中剂量组68.75%出现了术后疼痛，高剂量组100%出现了术后疼痛，37.5%出现了关节积液 hUC-MSCs (human umbilical cord mesenchymal stem cells)：人脐带间充质干细胞；KOA(knee osteoarthritis)：膝骨关节炎；WOMAC(western ontario and mcmaster universities osteoarthritis index)：西安大略和麦克马斯特大学骨关节炎指数；VAS(visual analogue scale)：视觉模拟评分表；HA(hualuronic acid)：透明质酸；IKDC(International Knee Documentation Committee Subjective Knee Form)：国际膝关节评分委员会膝关节主观功能评分量表；ICRS(International Cartilage Repair Society)：国际软骨修复协会；HTO(high tibia osteotomy)：胫骨高位截骨术；BMAC(bone marrow aspirate concentrate): 骨髓抽吸浓缩物；KOOS (knee injury and osteoarthritis outcome score)：膝关节损伤和骨关节炎结果评分；SVF(stromal vascular fraction)：基质血管组分 2.2 hUC-MSCs的临床干预方案
2.2.1 细胞来源
研究使用的hUC-MSCs来源分为自行提取/培养和成品商品2种类型。自行培养/提取的hUC-MSCs又可分为脐带血来源和Wharton jelly组织来源。成品商品主要是Cartistem®，由Medipost公司生产的含有hUC-MSCs(7.5×106细胞)和4%HA的成品。
2.2.2 细胞使用方式
研究多采用开放性手术制造关节软骨缺损，并植入hUC-MSCs，部分研究采用直接或超声引导下关节内注射hUC-MSCs，还有部分研究采用hUC-MSCs植入与胫骨高位截骨术(high tibia osteotomy，HTO)及微骨折手术联合治疗方案。
2.2.3 细胞剂量和频次
hUC-MSCs植入量多控制于(0.75~4.5)×107细胞/关节，也有研究采用较高剂量的hUC-MSCs(1×108细胞/关节)进行注射。关节内注射疗法更为简便，且可重复性更高，可进行多次注射，临床多采用1~6个月间隔注射，也有研究采用间隔1周，共计4次的注射方案。具体注射剂量及频次有待继续研究优化，以寻找最佳的注射剂量及频次，为患者提供个性化的治疗方案。
2.3 临床疗效
研究多采用视觉模拟评分(visual analogue scale，VAS)、西安大略和麦克马斯特大学骨关节炎指数(western ontario and mcmaster universities osteoarthritis index，WOMAC)、国际膝关节评分委员会膝关节主观功能评分量表(International Knee Documentation Committee Subjective Knee Form，IKDC)及膝关节损伤和骨关节炎结果评分(knee injury and osteoarthritis outcome score，KOOS)对关节的疼痛程度、功能障碍及临床疗效进行评估，并通过关节镜下国际软骨修复学会(international cartilage repair society，ICRS) 评分及软骨修复组织磁共振观察(magnetic resonance observation of cartilage repair tissue，MOCART) 评分评估关节软骨的修复情况，也有部分研究采用SF-12(short form-12)生活质量评分、SF-36量表、Lysholm量表对KOA患者的生活质量进行评估。结果发现，hUC-MSCs治疗可显著改善患者的膝关节宏观评分和疼痛指数。关节镜下观察显示，患者软骨修复等级也得到了显著提升。且无论单独应用还是与HA、HTO或微骨折手术联合应用，hUC-MSCs在改善膝关节功能和缓解疼痛方面均优于传统手术方法。进一步的剂量效应研究结果显示，低剂量和中剂量组在疼痛缓解和功能改善方面表现出相似效果，而高剂量组的效果相对较低，提示hUC-MSCs的治疗效果可能与其浓度剂量相关[47]。
2.4 不良反应
多项研究均报告患者术后存在轻微不良反应，如疼痛、肿胀、麻木、活动范围减少、关节积液、血肿和浅表静脉炎等[37-38, 41-42, 44-45, 47]。这些不良反应通常在注射后3~12 h内出现，具有自限性(可在3 d内缓解)，部分患者需通过相关的干预措施进行控制[37]。关于移植及合并HTO、微骨折手术的研究，由于手术创伤较大，患者难以区分疼痛的具体来源，且术后通常采取制动措施，在一定程度上减少了关节腔的挤压，从而影响了对于不良反应的客观观察[24, 43, 46]。Matas等[47]研究显示，高剂量组患者普遍出现关节疼痛和肿胀，而低剂量组仅有40%的患者出现类似症状，提示不良反应的发生可能与注射的hUC-MSCs浓度相关。关于这些不良反应的发生机制，有研究推测可能与注射行为本身有关，也可能与关节内干细胞诱导的轻度滑膜炎症有关[38, 41, 45]。但目前仍缺乏充分的证据证实不良反应发生的具体机制，有待进一步探索。
2.5 不良反应的处理
在临床研究中，为了应对治疗相关不良反应，通常采取如下管理措施：预防性注射地塞米松、使用止痛药物或进行关节穿刺抽液[37-38]。实践证明，此类方法可有效控制症状，且在术后6个月至5年的随访过程中未观察到与治疗相关的死亡或严重事件，提示该疗法较安全[18, 48]。未来，可考虑进一步优化治疗方式和hUC-MSCs浓度，以寻求最佳治疗效果与最小不良反应，为患者提供更加优质的治疗体验。
3. 小结与展望
综上所述，应用hUC-MSCs治疗KOA可显著改善患者关节功能、缓解疼痛和促进软骨修复，且显示出良好的安全性。对于轻中度KOA患者，hUC-MSCs注射疗法相较于传统疗法具有更小的创伤、更高的经济可行性和更好的疗效[6, 17, 37]。对于膝关节病变严重，如KL 3~4级或ICRS Ⅲ~Ⅳ级的患者，采用HTO联合hUC-MSCs移植可能提供更优的治疗效果[24, 40, 46]。然而目前的研究证据并不充分，为提高研究质量，建议未来延长随访时间、扩大样本量，开展更多的随机对照试验，以增强证据质量和可靠性。
目前，我国已成功构建了临床级hUC-MSCs资源库，包括种子细胞库、主细胞库和工作细胞库，能够为干细胞研究提供质量可控的临床级hUC-MSCs资源[49]。然而，未来若要将hUC-MSCs治疗KOA广泛应用于临床实践，仍需解决一些关键问题。首先，细胞扩增问题亟待解决。尽管已有研究表明微载体-生物反应器系统可提高hUC-MSCs的扩增效率并延缓衰老[50-51]，但目前的扩增速度仍未能满足大规模临床应用需求。未来研究需聚焦于开发更高效、稳定的扩增技术，以确保细胞数量和质量满足高标准的临床应用。其次，需明确hUC-MSCs在KOA治疗中的作用机制，并探索不良反应的成因，这对于优化治疗方案和提升患者治疗体验至关重要。再次，由于KOA患者在不同阶段病情差异明显，需进行更多的临床试验，以确定最佳治疗剂量和频率，实现个性化治疗。最后，为确保hUC-MSCs的临床应用，必须建立完整的产品生产和质量控制流程。同时，还需警惕商业化过程中的利益冲突，确保治疗推广严格基于科学证据。期待通过上述问题的不断解决，进一步提高hUC-MSCs治疗的有效性和安全性，为KOA患者带来更多福音。
特别说明：根据最新病毒学分类，共识中涉及的部分病毒英文名称进行了更新，为便于读者理解，本共识仍沿用传统病毒名称。详细更名信息如下：甲型、乙型流感病毒最新命名分别为“Alphainfluenzavirus influenzae” “Betainfluenzavirus influenzae”；人冠状病毒OC43、229E、HKU1、NL63最新命名分别为“Betacorona-virus gravedinis” “Alphacoronavirus chicagoense” “Betacoronavirus hongkongense ”“Alphacoronavirus amsterdamense”；呼吸道合胞病毒最新命名为“Orthopneumovirus hominis”；人鼻病毒被归为肠道病毒属，鼻病毒A、B、C最新命名分别为“Enterovirus alpharhino” “Enterovirus betarhino” “Enterovirus cerhino”；副流感病毒1~4型最新命名分别为“Respirovirus laryngotracheitidis ”“Orthorubulavirus laryngotracheitidis” “Respirovirus pneumoniae” “Orthorubulavirus hominis”；腺病毒主要型别最新命名为“Mastadenovirus blackbeardi”；博卡病毒最新命名为“Bocaparvovirus primate”；偏肺病毒最新命名为“Metapneumovirus hominis”；麻疹病毒为最新命名为“Morbillivirus hominis”；尼帕病毒最新命名为“Henipavirus nipahense”；亨德拉病毒最新命名为“Henipavirus hendraense”。作者贡献：徐英春、王健伟牵头制订共识框架并组建专家组；王瑶负责共识提纲编制，组织协调专家组成员对共识内容进行修订及讨论；王瑶、李雪、罗征宇、陈家炜、张栋、张璐璐负责撰写共识草案；王瑶、李雪负责对专家意见进行汇总，并对共识内容进行完善；所有编写组成员负责对共识内容进行修订；所有编审专家共同参与共识审稿并提出修订意见；徐英春、王健伟、任丽丽对共识全文进行最终审校并形成共识终稿。利益冲突：所有参与共识制订的人员均声明不存在利益冲突编写组(按贡献进行排序)：王瑶(中国医学科学院北京协和医院)，李雪(中国医学科学院北京协和医院)，罗征宇(中国医学科学院北京协和医院)，陈家炜(中国医学科学院北京协和医院)，张栋(中国医学科学院北京协和医院)，张璐璐(中国医学科学院病原生物学研究所)，李琰冰(中国医学科学院北京协和医院)，李懿(中国医学科学院北京协和医院)，黄雨妍(中国医学科学院北京协和医院)，刘晓妤(中国医学科学院北京协和医院)，吴云(中国医学科学院北京协和医院)，朱盈(中国医学科学院北京协和医院)，王迪(中国医学科学院北京协和医院)，陈新飞(中国医学科学院北京协和医院)，宁雅婷(中国医学科学院北京协和医院)，张戈(中国医学科学院北京协和医院)，任丽丽(中国医学科学院病原生物学研究所)，徐楷文(中国医学科学院北京协和医院)编审专家组(按姓氏拼音首字母排序)：阿祥仁(青海省人民医院)，樊尚荣(北京大学深圳医院)，高春海(临沂市人民医院)，龚杰(中国疾病预防控制中心传染病预防控制所)，顾兵(广东省人民医院)，郭鹰(重庆医科大学附属巴南医院)，郭主声(东莞东华医院)，胡继红(北京医院国家老年医学中心国家卫生健康委临床检验中心中国医学科学老年医学研究院)、胡辛兰(福州大学附属省立医院)，黄涛(海南省人民医院)，贾伟(宁夏医科大学总医院)，江雁(天津市第一中心医院)，金炎(山东省立医院)，康梅(四川大学华西医院)，柯江维(江西省儿童医院)，李彬(福建医科大学附属协和医院)，栗东方(深圳华大基因股份有限公司)，李俊明(南昌大学第一附属医院)，李小宁[皖南医学院第一附属医院(弋矶山医院)]，李妍(中国医学科学院北京协和医院)，李永军(广州微远基因科技有限公司)，李轶(河南省人民医院)，林勇平(中国医学科学院肿瘤医院深圳医院)，鲁炳怀(中日友好医院)，罗燕萍(中国药师协会)，马筱玲(中国科技大学附属第一医院)，满思金(滕州市中心人民医院)，毛小琴(云南省第一人民医院)，宁永忠(北京市垂杨柳医院)、潘艳(江苏省涟水县人民医院)，单斌(昆明医科大学第一附属医院)，唐朝贵(淮安市第一人民医院)，王晶(大连医科大学附属第一医院)，王艳(首都医科大学附属北京积水潭医院)，王勇(佳木斯大学附属第一医院)，王则宇(郑州安图生物工程股份有限公司)，王忠芳(广州医科大学附属第一医院呼吸疾病国家重点实验室)，魏莲花(甘肃省人民医院)，夏云(重庆医科大学附属附属第一医院)，肖敏敏(芜湖市第二人民医院)，谢良伊[湖南省人民医院(湖南师范大学附属第一医院)]，徐雪松(吉林大学中日联谊医院)，许爱敏(喀什地区第一人民医院)，许建成(吉林大学第一医院)，杨怀德(湖南省张家界市人民医院)，杨莉莉(四川省成都市第三人民医院)，杨青(浙江大学医学院附属第一医院)，喻华(四川省医学科学院.四川省人民医院)，袁红霞(郴州市第一人民医院)，奕巧莲(中国医学科学院北京协和医院)，张国军(首都医科大学附属北京天坛医院)，张建中(中国疾病预防控制中心传染病预防控制所)，张静(复旦大学附属中山医院)，张利侠(陕西省人民医院)，张义(山东大学齐鲁医院)，张智洁(中国医科大学附属盛京医院)，赵平森(粤北人民医院)，赵颖(中国医学科学院北京协和医院)，郑炘(中山大学肿瘤防治中心)，周铁丽(温州医科大学附属第一医院)，朱传龙(南京医科大学第一附属医院)，朱华栋(中国医学科学院北京协和医院)，朱镭(山西省儿童医院) -
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图 1 呼吸道传染性病原体分级检测流程
*第一级病毒包括甲型流感病毒、乙型流感病毒、严重急性呼吸综合征冠状病毒2型、呼吸道合胞病毒、人鼻病毒、人副流感病毒、人腺病毒、季节性人冠状病毒、人博卡病毒、人偏肺病毒等；细菌包括嗜肺军团菌和A群链球菌等；非典型病原体包括肺炎支原体、肺炎衣原体等；#第二级目标病原体包括结核分枝杆菌、耶氏肺孢子菌、百日咳鲍特菌、白喉棒杆菌、鼠疫耶尔森菌、禽流感病毒、麻疹病毒和鹦鹉热衣原体等；▲第三级已知病原体包括中东呼吸综合征冠状病毒、尼帕病毒和亨德拉病毒等；§非传染性常见病原体包括肺炎链球菌、流感嗜血杆菌、肺炎克雷伯菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌等
Figure 1. Tiered detection process for respiratory infectious pathogens
*Tier 1:viruses include influenza A virus, influenza B virus, severe acute respiratory syndrome coronavirus 2, respiratory syncytial virus, human rhinovirus, human parainfluenza virus, human adenovirus, seasonal human coronavirus, bocavirus, human metapneumovirus, etc.; bacteria include Legionella pneumophila, and group A Streptococcus, etc.; atypical pathogens include Mycoplasma pneumoniae, Chlamydia pneumoniae, etc. #Tier 2:target pathogens include Mycobacterium tuberculosis, Pneumocystis jirovecii, Bordetella pertussis, Corynebacterium diphtheriae, Yersinia pestis, avian influenza virus, measles virus, Chlamydia psittaci, etc. ▲Tier 3: known pathogens include Middle East respiratory syndrome coronavirus, Nipah virus, and Hendra virus, etc. §Non-infectious common pathogens include Streptococcus pneumoniae, Haemophilus influenzae, Klebsiella pneumoniae, Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa, etc.
表 1 2001年牛津循证医学中心证据等级分类标准
Table 1 2001 Oxford centre for evidence-based medicine levels of evidence classification
证据等级 证据描述 1a 同质随机对照试验的系统评价 1b 单项随机对照试验 1c “全或无”证据(治疗前所有患者死亡，治疗后部分患者存活；或治疗前部分患者死亡，治疗后无患者死亡) 2a 同质队列研究的系统评价 2b 单项队列研究(包括低质量随机对照试验，如＜80%随访) 2c 结果研究，生态学研究 3a 同质病例对照研究的系统评价 3b 单项病例对照研究 4 病例报道(低质量队列研究) 5 基于未经验证的专家意见或评论 
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类型 呼吸道传染性病原体 呼吸道非传染性病原体* 病毒 流感病毒、冠状病毒、呼吸道合胞病毒、人鼻病毒、人副流感病毒、人腺病毒、人博卡病毒、人偏肺病毒、麻疹病毒、尼帕病毒和亨德拉病毒等 - 细菌 结核分枝杆菌、嗜肺军团菌、百日咳鲍特菌、白喉棒杆菌、A群链球菌、鼠疫耶尔森菌 肠杆菌目细菌(如肺炎克雷伯菌等)、金黄色葡萄球菌、鲍曼不动杆菌、铜绿假单胞菌、肺炎链球菌#、流感嗜血杆菌#等 真菌 耶氏肺孢子菌 曲霉属、镰刀菌属、毛霉目、马尔尼菲篮状菌、隐球菌属、组织胞浆菌属和球孢子菌属等 非典型病原体 肺炎支原体、肺炎衣原体、鹦鹉热衣原体 沙眼衣原体† *可引起呼吸道感染，尚无明确传染性证据；#呼吸道传染性证据较弱；†呼吸道感染以母婴传播导致新生儿肺炎为主；-：无
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表 3 呼吸道传染性病原体推荐检测技术及易感因素
Table 3 Recommended diagnostic techniques for respiratory infectious pathogens and susceptibility factors
检测分级 病原体种类 病原体 样本类型 推荐检测技术 易感人群 临床表现 流行季节* 接触史 涂片镜检 分离培养 抗原 抗体 核酸检测 宏基因组测序& 常见病原体 病毒 甲型流感病毒(H1N1、H2N2和H3N2等) √ √ √ 普遍易感 流行性感冒、病毒性肺炎 北方高纬度地区：冬季；中纬度地区：冬季和夏季；低纬度最南部地区：春季 有，可聚集发病 乙型流感病毒 √ √ √ 普遍易感 流行性感冒、病毒性肺炎 冬季 有，可聚集发病 季节性人冠状病毒(229E、NL63、OC43和HKU1) √ 普遍易感 普通感冒，轻症为主 冬春季 有 严重急性呼吸综合征冠状病毒2型 √ √ √ 普遍易感 轻症至肺炎 冬春季 有 呼吸道合胞病毒 鼻咽拭子、BALF、血液 √ √ √ ＜2岁儿童为主，成人、老年人也可感染 气管炎、细支气管炎和肺炎 北方：冬春季；南方：冬季和雨季 有，可聚集发病 人鼻病毒 √ ＜5岁儿童为主 普通感冒，轻症，与哮喘、COPD相关 秋季、早春，温带一年四季 有 人腺病毒 √ √ √ 普遍易感 轻症为主，可引起严重CAP 北方：冬春季；南方：春夏季 有，可聚集发病 人副流感病毒 √ √ ＜5岁儿童、免疫低下成人和老年人 喉炎，支气管炎和肺炎 春夏季，温带常年 有 人博卡病毒 √ 儿童、成人 毛细支气管炎、百日咳样疾病 冬春季 有 人偏肺病毒 √ 儿童、免疫损伤人群 普通感冒、细支气管炎、肺炎、哮喘 冬春季 有 细菌 嗜肺军团菌 痰、气管或支气管吸取物、BALF、肺组织、血液等 √ √# √ √ √ - 军团菌肺炎 春末至秋初 接触污染的水，可聚集发病 A群链球菌 咽拭子 √ √ √ 儿童、青少年为主 急性咽炎、扁桃体炎、猩红热等 冬春季 有，可聚集发病 非典型病原体 肺炎支原体 鼻咽拭子、BALF、血液 √ √ √ √ 儿童、青少年为主 支气管炎、急性咽炎、肺炎 北方：秋冬季；南方：夏秋季 有，可聚集发病 肺炎衣原体 鼻咽拭子、BALF、血液 √ √ √ 儿童、青少年、老年人 咽炎、鼻窦炎和中耳炎、急性支气管炎、慢性支气管炎、哮喘、肺炎 一年四季 有，可聚集发病 少见及慢性感染病原体 病毒 禽流感病毒 鼻咽拭子、BALF √ √ √ 普遍易感 下呼吸道症状更多见，可有胃肠道症状 - 接触感染的家禽、鸟类 麻疹病毒 鼻咽拭子、BALF、血液 √ √ √ 未接种疫苗的人群 发热、皮肤红色斑丘疹、眼结膜炎、麻疹黏膜斑 - 接触麻疹患者，可聚集发病 细菌 结核分枝杆菌 痰、气管或支气管吸取物、BALF、肺组织、血液等 √ √# √ √§ √ √ 免疫低下、营养不良人群 肺结核 - 接触结核患者 百日咳鲍特菌 痰、气管或支气管吸取物、BALF、血液等 √ √# √ √ √ 婴幼儿，尤其未接种疫苗者 阵发性咳嗽、吸入性哮鸣音、咳嗽后呕吐 - 家庭、幼儿园或学校接触患者 白喉棒杆菌 咽拭子、血液 √ √ √ √ 儿童和青少年；未接种疫苗的儿童 主要侵犯咽喉，引起咽喉肿痛、吞咽困难、淋巴结炎、低热、乏力、头痛、呼吸道阻塞 - 有 鼠疫耶尔森菌 痰、淋巴结穿刺液、血液、咽部分泌物等 √ √ √ √ - 肺鼠疫：突然起病，寒战发热、胸痛、咳嗽、呼吸困难、咯血 - 接触染疫动物或肺鼠疫患者 真菌 耶氏肺孢子菌 痰、气管或支气管吸取物、BALF等 √ √ √ 免疫抑制患者或免疫正常人群 缺乏特异性，以发热、干咳、呼吸困难常见，可并发呼吸衰竭 - 接触患者 非典型病原体 鹦鹉热衣原体 鼻咽拭子、痰、气管或支气管吸取物、BALF等 √ √ √ 家禽饲养员和加工者 重症肺炎，发热、寒战、肌肉疼痛、剧烈头痛、肝和/或脾大及胃肠道症状 - 接触病禽或患者，可聚集发病 新发突发病原体 病毒 中东呼吸综合征冠状病毒 鼻咽拭子、痰、气管或支气管吸取物、BALF等 √ 中东地区或有疫情暴发地旅居史人群 重症肺炎 - 接触骆驼 尼帕病毒、亨德拉病毒 鼻咽拭子、痰、气管或支气管吸取物、BALF等 √ 有孟加拉国、印度等旅居史人群 非典型肺炎和神经系统症状，甚至脑炎或昏迷 - 家畜接触史 BALF(bronchoalveolar lavage fluid)：支气管肺泡灌洗液；COPD(chronic obstructive pulmonary disease)：慢性阻塞性肺疾病；CAP(community acquired pneumonia): 社区获得性肺炎; *指流行高峰，除此之外其他时间也可发生相关感染；#选择性培养基；§γ干扰素释放试验或结核感染T细胞斑点试验检测；-: 无特殊规律；&宏基因组测序可检测本共识涉及的各类病原体，但不推荐作为常见病原体、少见及慢性感染病原体的首选检测技术
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